ⅠNúkleínsýraikynning
Kjarnsýra skiptist í deoxýríbónsýru (DNA) og ríbónsýru (RNA), þar á meðal skiptist RNA í ríbósómal RNA(rRNA), boðbera RNA(mRNA) og flutnings-RNA(tRNA) í samræmi við mismunandi hlutverk þess.DNA er aðallega einbeitt í kjarna, hvatberum og klóróformi en RNA dreifist aðallega í umfryminu.Sem efnislegur grundvöllur genatjáningar gegnir kjarnsýruútdráttur afar mikilvægu hlutverki í sameindalíffræðirannsóknum og klínískri sameindagreiningu.Styrkur og hreinleiki kjarnsýruútdráttar mun hafa bein áhrif á síðari PCR, raðgreiningu, smíði vektor, ensímmeltingu og aðrar tilraunir.
Ⅱ Kjarnsýruútdráttur og hreinsunaraðferð
① Fenól/klóróform útdráttaraðferð
Fenól/klóróform útdráttur er klassísk aðferð við DNA útdrátt, þar sem aðallega eru notuð tvö mismunandi lífræn leysiefni til að meðhöndla sýnin, leysa upp DNA byggða kjarnsýru í vatnsfasanum, lípíð í lífræna fasanum og prótein á milli fasanna tveggja.Þessi aðferð hefur kosti lágs kostnaðar, mikils hreinleika og góðra áhrifa.Ókostirnir eru flókin aðgerð og langur tími.
② Trizol aðferð
Trizol aðferð er klassísk aðferð til RNA útdráttar.Trizol aðferðinni er skipt í vatnsfasa og lífrænan fasa eftir skilvindu með klóróformi, þar sem RNA er leyst upp í vatnsfasanum, vatnsfasinn er fluttur í nýtt EP rör, útfelling fæst eftir að ísóprópanóli hefur verið bætt við og síðan etanólhreinsun.Þessi aðferð er hentug fyrir RNA-útdrátt úr dýravef, frumum og bakteríum.
③ Miðflótta súluhreinsunaraðferð
Hreinsunaraðferð með miðflótta súlu getur aðsogað DNA sérstaklega í gegnum sérstök kísilfylkisaðsogsefni, á meðan RNA og prótein geta farið vel, og síðan notað hátt salt lágt PH til að sameina kjarnsýru, lágt salt hátt PH gildi skolun til að aðskilja og hreinsa kjarnsýru.Kostirnir eru hár hreinsunarstyrkur, mikill stöðugleiki, engin þörf á lífrænum leysi og lítill kostnaður.Ókosturinn er sá að það þarf að skilvindu skref fyrir skref, fleiri aðgerðaskref.
④ Aðferð með segulperlum
Segulperlur aðferðin er að kljúfa frumuvefjasýnið í gegnum lýsatið, losa kjarnsýruna í sýninu og síðan eru kjarnsýrusameindirnar sérstaklega aðsogaðar á yfirborð segulperlunnar á meðan óhreinindi eins og prótein og sykur eru skilin eftir í vökvanum.Með skrefum frumuvefsskiptingar, segulperlubindingu við kjarnsýru, kjarnsýruþvott, kjarnsýruskolun o.s.frv., fæst hrein kjarnsýra að lokum.Kostirnir eru einföld aðgerð og stutt notkun, án þess að þörf sé á þrepaskilvindu.Það hefur litlar tæknilegar kröfur og getur gert sér grein fyrir sjálfvirkum og fjöldaaðgerðum.Sérstök samsetning segulperlu og kjarnsýra gerir útdregna kjarnsýruna með miklum styrk og hreinleika.Ókosturinn er sá að núverandi markaðsverð er tiltölulega dýrt.
⑤ Aðrar aðferðir
Til viðbótar við ofangreindar fjórar aðferðir eru sjóðandi sprungur, þétt saltaðferð, anjónísk þvottaefnisaðferð, úthljóðsaðferð og ensímaðferð osfrv.
Ⅲ Tegund kjarnsýruútdráttar
Foregene er með heimsins leiðandi Direct PCR vettvang, tveggja dálka RNA einangrunarvettvang (aðeins DNA + RNA eingöngu).Helstu vörurnar eru DNA/RNA einangrunarsett, PCR og bein PCR hvarfefni sameinda rannsóknarstofu hvarfefni röð.
① Heildar RNA útdráttur
Heildar RNA útdráttarsýni innihalda blóð, frumur, dýravef, plöntur, vírusa o.s.frv. Háan hreinleika og háan styrk heildar-RNA er hægt að fá með heildar-RNA útdrætti, sem hægt er að nota í RT-PCR, flísgreiningu, in vitro þýðingu, sameindaklónun, Dot Blot og aðrar tilraunir.
Foregene tengtRNA einangrunarsett
Animal Total RNA einangrunarsett--Dragðu út háhreint og hágæða heildar-RNA á fljótlegan og skilvirkan hátt úr ýmsum dýravefjum.
Cell Total RNA Einangrunarsett--Mjög hreinsað og hágæða heildar-RNA er hægt að fá úr ýmsum ræktuðum frumum á 11 mínútum.
Plant Total RNA Einangrunarsett--Dragðu út hágæða heildar-RNA fljótt úr plöntusýnum með lágu fjölsykru- og fjölfenólinnihaldi.
Veiru RNA einangrunarsett- Einangraðu og hreinsaðu veiru-RNA hratt úr sýnum eins og plasma, sermi, frumulausum líkamsvökva og frumuræktunarfrumvökva.
② Erfðafræðilegt DNA útdráttur
Erfðafræðileg DNA útdráttarsýni innihalda jarðveg, saur, blóð, frumur, dýravef, plöntur, vírusa osfrv. Erfðafræðileg DNA útdráttur er hægt að nota við ensímmeltingu, DNA bókasafnsbyggingu, PCR, mótefnablöndur, Western blot blendingargreiningu, genaflís, há -framleiðsla raðgreiningar og aðrar tilraunir.
Foregene tengtDNA einangrunarsett
DNA einangrunarsett fyrir vefja dýra--Hröð útdráttur og hreinsun erfðafræðilegs DNA frá mörgum uppsprettum, svo sem dýravef, frumum o.s.frv.
Blóð DNA Midi Kit (1-5ml)--Hreinsaðu hágæða erfðafræðilegt DNA fljótt úr segavarnarblóði (1-5ml).
DNA einangrunarsett fyrir munnþurrku/FTA kort--Hreinsaðu hágæða erfðafræðilegt DNA fljótt úr munnþurrku/FTA kortasýnum.
Plant DNA einangrunarsett--Hreinsaðu fljótt og fáðu hágæða erfðafræðilegt DNA úr plöntusýnum (þar á meðal fjölsykrur og fjölfenól plöntusýni)
③ Plasmíð útdráttur
Plasmíð er eins konar hringlaga smásameind DNA í frumum, sem er algengur burðarefni fyrir DNA endurröðun.Aðferðin við plasmíðútdrátt er að fjarlægja RNA, aðskilja plasmíð frá erfðamengi DNA baktería og fjarlægja prótein og önnur óhreinindi til að fá tiltölulega hreint plasmíð.
General Plasmid Mini Kit--Hreinsaðu hágæða plasmíð DNA fljótt úr umbreyttum bakteríum fyrir venjubundnar sameindalíffræðilegar tilraunir eins og umbreytingu og ensímmeltingu
④ Aðrar útdráttargerðir, miRNA útdráttur osfrv.
Dýra miRNA einangrunarsett--Taktu fljótt og skilvirkt út lítil RNA brot af 20-200nt miRNA, siRNA, snRNA úr ýmsum dýravef og frumum
Ⅳ Kröfur um kjarnsýruútdrátt og hreinsun verða tils
① Til að tryggja heilleika frumbyggingar kjarnsýru.
② Draga úr truflunum á próteinum, sykri, lípíðum og öðrum stórsameindum
③ Það ætti ekki að vera lífrænt leysiefni eða hár styrkur málmjóna sem geta hindrað ensímið í kjarnsýrusýnum.
④ Útrýma ætti RNA og annarri kjarnsýrumengun þegar DNA er dregið út og öfugt.
Pósttími: 24. nóvember 2022
